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植物游離氨基酸檢測試劑盒(茚三酮法)檢測原理
氨基酸,是含有堿性氨基和酸性羧基的有機化合物,化學(xué)式是RCHNH2COOH。羧酸碳原子上的氫原子被氨基取代后形成的化合物。氨基酸分子中含有氨基和羧基兩種官能團。
與羥基酸類似,氨基酸可按照氨基連在碳鏈上的不同位置而分為α-,β-,γ-,w-...氨基酸,但經(jīng)蛋白質(zhì)水解后得到的氨基酸都是α-氨基酸,而且僅有二十二種,包括甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、甲硫氨酸(蛋氨酸)、脯氨酸、色氨酸、絲氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、蘇氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、硒半胱氨酸和吡咯賴氨酸 (僅在少數(shù)細菌中發(fā)現(xiàn)),它們是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位
規(guī)格:100T
保存:4℃,避光
有效期:6個月
用途:主要用于檢測血清、尿液、植物組織、食品、藥品等中的總游離氨基酸含量。
說明:檢測原理是在弱酸條件下,氨基酸與茚三酮共熱情況下,能定量的產(chǎn)生藍紫色的二酮茚胺(又稱Ruhemans紫),其吸收峰在波長570nm處,在一定范圍內(nèi)顏色深淺(即吸光度)與氨基酸濃度成正比
注意事項
1、實驗材料應(yīng)盡量新鮮,如取材后不立即使用,應(yīng)存于4C。
2、氨基酸與茚三酮產(chǎn)生藍紫色的二酮茚胺(又稱 Ruhemans紫)在1-1.5h內(nèi)能保持穩(wěn)定故稀釋后應(yīng)盡快檢測。
3、 AA Assay buffer應(yīng)密閉保存,防止揮發(fā)
4、空氣中的氧氣有可能干擾顯色步驟,但維生素C不易加多,否則導(dǎo)致吸光度人為偏大
5、在80℃水浴中孵育加熱,可使顯色更為穩(wěn)定。
6.如果沒有分光光度計,也可以使用普通的酶標(biāo)儀測定,但應(yīng)考慮酶標(biāo)儀的大檢測體積
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