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免疫組化實(shí)驗(yàn)就選SP檢測(cè)試劑盒,效果好!

更新時(shí)間:2020-07-24      瀏覽次數(shù):357

免疫組化實(shí)驗(yàn)就選SP檢測(cè)試劑盒,效果好!

 

本試劑盒適合于一抗為小鼠/兔 IgG 的免疫組化實(shí)驗(yàn) DAB 顯色。SP 試劑盒是專為免疫組化和其他免疫檢測(cè)而設(shè)計(jì)的,用以顯示組織和細(xì)胞中抗原分布。鏈霉親和素(StreptAvidin)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì),同親和素一樣,對(duì)生物素有*的親和力,親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)(PI=10),經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性,對(duì)組織和細(xì)胞的非特異吸附很低,因此基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。

操作步驟:(以石蠟切片為例) 
1. 切片常規(guī)脫蠟至水(三次二甲苯,三次乙醇)。

2. 3% H2O2 室溫處理 5-10 分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗 3 次。

3.可選步聚:
a、熱修復(fù)抗原,將切片浸入 0.01M 檸檬酸鈉緩沖液(PH6.0),電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔 5-10 分鐘后,反復(fù) 1-2 次。冷卻后 PBS(pH7.2-7.6)洗滌 1-2 次。
b、酶消化,滴加消化液,37℃10 分鐘,PBS(pH7.2-7.4)洗滌 2-3 次。
c、跳過(guò)此步,直接進(jìn)入下一步。

4. 滴加封閉液,室溫 20 分鐘。甩去多余液體,免洗。

5. 用稀釋液將一抗按一定比例稀釋(稀釋后的一抗 4℃可保存一周),也可另行購(gòu)買抗體稀釋液。滴加稀釋的一抗 37℃ 孵育 1 小時(shí)左右或 20℃ 2 小時(shí)左右,也可 4℃過(guò)夜。PBS(pH7.2-7.4)洗滌 3次,每次 2 分鐘。(一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來(lái)說(shuō),陽(yáng)性染色強(qiáng)度不夠時(shí),可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間;背景過(guò)高時(shí),可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。)

6. 根據(jù)用量,用稀釋液將 Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 濃縮液按 1:100 稀釋成工作液(1ml 稀釋液加入 10ul Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 濃縮液混勻,此工作液 4℃可保存一周)。滴加 Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 工作液,20-37℃ 孵育 30 分鐘。PBS(pH7.2-7.4)洗滌 3 次,每次 2 分鐘。

7.根據(jù)使用量,用稀釋液將鏈酶親和素-POD 濃縮液按 1:100 稀釋成工作液(1ml 稀釋液加入 10ul鏈酶親和素-POD 濃縮液混勻,此工作液 4℃可保存一周)。滴加鏈酶親和素-POD 工液,20-37℃,30 分鐘。PBS (pH7.2-7.4)洗滌 4 次,每次 5 分鐘。

8.DAB 顯色:根據(jù)用量,用 PBS(pH7.2-7.4)配制,按 1ml PBS 加入 50ul 20×DAB 顯色液 A,加入 50ul 20×DAB 顯色液 B 。充分混勻后滴加到切片上。室溫顯色,鏡下控制反應(yīng)時(shí)間,一般在 5-30分鐘之間。蒸餾水洗滌終止反應(yīng)。

9.蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。對(duì)于細(xì)胞爬片,固定后,PBS 漂洗兩次,再用 0.5% Triton X-100 室溫孵育 20 分鐘,PBS 漂洗兩次,3% H2O2 處理 15 分鐘;PBS 漂洗兩次,接上述第 4 步。對(duì)于冰凍切片,固定后,PBS 漂洗兩次,接上述第二步。

 

億迅生物公司主要代理產(chǎn)品:
ELISA試劑盒:進(jìn)口ELISA試劑盒,國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清:胎牛血清,人血清,動(dòng)物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。
生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。

標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品:進(jìn)口對(duì)照品,進(jìn)口對(duì)照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體:一抗,二抗,流式抗體等。
放免試劑盒:進(jìn)口放免試劑盒,國(guó)產(chǎn)放免試劑盒,進(jìn)口美國(guó)鳳凰等放免試劑盒。
實(shí)驗(yàn)室代測(cè)服務(wù):放免代測(cè),WB實(shí)驗(yàn),免疫組化代測(cè),熒光定量PCR代測(cè),病理細(xì)胞染色代測(cè),生化實(shí)驗(yàn)代測(cè)等。

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    南京億迅生物科技有限公司

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    025-65010873

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