一级黄色视频色狼九九_91亚洲人成手机在线观看_国产 直播 无码_免费观看的av在线播放

新聞中心

我的位置:首頁  >  新聞中心  >  經(jīng)典酵母轉化試劑盒專用于:釀酒酵母質粒轉化實驗

經(jīng)典酵母轉化試劑盒專用于:釀酒酵母質粒轉化實驗

更新時間:2021-05-07      瀏覽次數(shù):547

經(jīng)典酵母轉化試劑盒專用于:釀酒酵母質粒轉化實驗

 

酵母轉化試劑盒主要用于釀酒酵母質粒轉化實驗,該試劑盒遵循廣大用戶的使用習慣,分別提供PEG、LiAc和Carrier DNA溶液,PEG、LiAc均經(jīng)過濾除菌,Carrier DNA經(jīng)特殊優(yōu)化處理,更有助于提高質粒DNA的轉化效率。該試劑盒可根據(jù)實際需要靈活配制1 × LiAc溶液和轉化預混液,既方便使用,又經(jīng)濟實惠。

感受態(tài)細胞制備:

1.活化菌種。-80 ℃保存的菌種在YPDA培養(yǎng)基平板上劃線,30 ℃培養(yǎng)2-4天。

2.挑取酵母單菌落在YPDA培養(yǎng)基平板上劃3-5 mm,30 ℃培養(yǎng)2-4天。

3.待酵母單菌落長至直徑2 mm時,把酵母細胞接種到3 mL YPDA液體培養(yǎng)基中,30 ℃過夜培養(yǎng)。

4.第二天轉接到含有30-50 mL YPDA液體培養(yǎng)基的三角瓶中繼續(xù)培養(yǎng),待OD600達到0.4-0.5,3000 rpm離心5 min,棄上清。

5.沉淀用30-50 mL的無菌的去離子水懸浮。3000 rpm離心5 min,棄上清。

6.沉淀用1.5 mL 1 × LiAc(150 μL 10 × LiAc Solution加1350 μL無菌水)重懸后轉移至1.5 mL離心管中,3000 rpm離心5 min,棄上清。

注意:10 × LiAc Solution經(jīng)過pH緩沖,無需添加TE作為緩沖劑。

7.加入1 mL 1 × LiAc重懸,小體積轉化按照每管100 μL分裝,用于文庫轉化不分裝。

8.3000 rpm離心5 min,棄上清,感受態(tài)細胞即制備完畢。

注意:制備好的感受態(tài)好立即使用,在第8步離心前,室溫放置不應超過5小時。



酵母轉化原理:

像釀酒酵母,線性化的轉化DNA和Pichiapastoris基因組的同源區(qū)域發(fā)生同源重組,使得線性化DNA產(chǎn)生穩(wěn)定的轉化子

這樣的整合方式顯示穩(wěn)定性,即使多拷貝轉化子在沒有選擇壓力的情況下也很穩(wěn)定.單交換事件(插入)比雙交換事件(置換)發(fā)生幾率更大.單插入事件中約發(fā)生1-10%概率的多插入事件.

  • 企業(yè)名稱:

    南京億迅生物科技有限公司

  • 聯(lián)系電話:

    025-65010873

  • 公司地址:

    江蘇省南京市江寧高新園

  • 企業(yè)郵箱:

    196099363@qq.com

掃碼關注我們

Copyright © 2024南京億迅生物科技有限公司 All Rights Reserved    備案號:蘇ICP備2020061857號-1

技術支持:環(huán)保在線    管理登錄    sitemap.xml

服務熱線

025-65010873

掃碼添加微信

返回頂部