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肥達氏實驗試劑現(xiàn)貨秒發(fā)
標本準備:血清,靜脈血3ml不抗凝。
原理:用已知傷寒沙門菌菌體(O)抗原和鞭毛(H)抗原及甲、乙、丙3種副傷寒沙門菌鞭毛抗原的診斷菌液,與被檢血清作細菌凝集反應。若被檢血清中有抗體存在,可與相應抗原起反應,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象為陽性。
試劑:診斷菌液有傷寒O、H及副傷寒A、B、C,共5種。
使用時用生理鹽水稀釋成每毫升含7~10億(7*108~1*109)個菌的懸液備用。
檢測步驟:
1.取lOmm×lOOmm試管5排,每排8支。
2.另取15mm×lOOmm試管1支,加生理鹽水4.75m1及患者血清0.25ml混合,成為1:20稀釋血清。
3.每排第l管內各加1:20稀釋血清0.5ml。
4.在剩余的2.5ml稀釋血清(1:20)中加人生理鹽水2.5ml,成為1:40稀釋血清。
5.再取1:40的血清,分別加入每排第2管中,每管0.5ml。在剩余的2.5ml稀釋血清(1:40)中,加入生理鹽水2.5ml,成為1:80稀釋,再加入每排第3管中,每管0.5ml,如此操作,直至加完每排第7管為止。
6.每排zui后1管各加生理鹽水0.5ml,作為不含血清的菌液對照。
7.取5種菌液充分搖勻,每種菌液加1排,血清zui終稀釋度分別為1:40、1:80、1:160直至1:2560。振蕩混合,置37C水浴16~20h后觀察結果。
結果判斷:
先觀察液體部分清晰程度,然后輕輕搖動試管,觀察管底有無凝塊浮起:
1.液體澄清、管底有凝塊、細菌*凝集者(100%凝集),為柵++++。
2.液體微混濁、管底有明顯凝塊、細菌大部分凝集者(75%凝集),為+++。
3.液體較混濁、管底有明顯凝塊、細菌中度凝集者(50%凝集),為++。
4.液體混濁、管底無凝塊、細菌輕度凝集者(25%凝集),為+。
5.液體混濁、無凝集現(xiàn)象,為陰性。
6.對照管均勻混濁無凝集現(xiàn)象。
7.被檢血清出現(xiàn)++凝集的zui高稀釋倍數(shù)為凝集效價。如第3管出現(xiàn)仲凝集,則判為1:160陽性;如各管均無凝集現(xiàn)象,則判為<l:40。
正常參考值:傷寒沙門H凝集效價1:80以下,傷寒沙門菌O凝集效價及各型副傷寒沙門H凝集效價均在1:40以下。
注意事項:
1.過去曾預防接種傷寒、副傷寒疫苗者,H抗體效價明顯升高,并持續(xù)數(shù)年,而O抗體低于正常值。
2.以往患過傷寒病或曾接種傷寒疫苗,新近又感染流行感冒或布魯病,可產生價H抗體,O抗體則較低,但H抗體很快消失,此種反應稱回憶反應。
3.由于人們在日常生活中可能發(fā)生隱感染而產生抗體,尤其在流行地區(qū)正常人的凝集效價可稍高,故在判斷結果時應考慮本地區(qū)正常人群的自然凝集效價水平作為參考。
4.沙門菌屬各菌種之間有某種共同抗原,在凝集試驗中可能出現(xiàn)類屬交叉凝集反應,但效價較低。
5.陰性結果不能*排除傷寒的可能,應注意有10%左右已確診為傷寒者在整個病程中抗體效價始終不升高。這可能與早期應用抗生素、藥物抑制、免疫耐受和缺陷有關。
6.肥達反應特異性不高,機體免疫功能紊亂、結核、敗血癥、病毒性肝炎及部分血吸蟲患者可出現(xiàn)假陽性反應。
7.溶血、菌液過濃等均會影響結果。菌液過期或產生自凝者不宜使用。
肥達氏實驗試劑(目錄)
抗傷寒桿菌H血清
抗傷寒桿菌O血清
傷寒桿菌H菌液
傷寒桿菌O菌液
甲型副傷寒桿菌菌液
乙型副傷寒桿菌菌液
丙型副傷寒桿菌菌液
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