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預染色蛋白marker特征和應用
描述:預染色蛋白分子量標準Marker在蛋白凝膠電泳和轉膜時肉眼可見,因而可以動態(tài)指示蛋白條帶的遷移位置。預染色蛋白Marker還可隨目的蛋白一起轉膜并在膜上清楚顯現,因而可以用肉眼直接觀察蛋白轉膜是否成功。同時還能為膜的切割提供肉眼可見的指示,方便而安全地把膜分割用于多重抗體檢測。在Western Blot完成后,根據預染色蛋白Marker的位置,可以方便地估計目的蛋白條帶的分子量大小。
特征和應用:
即開即用
電泳時預染蛋白Marker肉眼可見
預染蛋白條帶可轉移到膜上
免除凝膠染色,免除膜染色
用于估計蛋白條帶大小和位置。
注意事項:
1. 開管前簡短離心以避免丟失。即開即用,用前切勿加熱變性。
2. 推薦加樣量為:每5 mm寬加樣孔(1.5 mm厚凝膠)加5-10µl。更寬加樣孔(>5mm)和厚凝膠( >1.5 mm)酌情多加。窄孔(<5 mm)薄膠(<1.5 mm)酌情少加。
3. 轉膜后膜上沒有或僅有很淡的預染蛋白Marker,說明電轉移方向不對或時間不足。大孔徑膜材料和非標準轉膜方法能使小分子蛋白Marker穿膜而過。
4. 由于光反射的因素,肉眼觀察同等量預染蛋白Marker的顏色深淺程度依次為:印跡膜上的預染蛋白>附于白色不透明襯底的凝膠上的預染蛋白>無襯底透明凝膠上的預染蛋白。
5. 電泳后預染色Marker的分離效果、是否清楚顯示每一條帶,取決于預染蛋白條帶大小、凝膠濃度、交聯(lián)度和電泳速度。
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