ATP 含量檢測(cè)試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品說明： ATP 廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細(xì)胞能量 代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測(cè)定 ATP 含量并且計(jì)算能荷，能夠反映能量代謝狀態(tài)。 HK 催化葡萄糖和 ATP 合成 6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步催化 6-磷酸葡萄糖脫氫 生成 NADPH ，NADPH 在 340nm 有特征吸收峰，NADPH 和 ATP 含量成正比，以此反應(yīng) ATP 含 量。

自備儀器和用品： 紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL 石英比色皿、研缽/勻漿器、蒸餾水和氯仿。 

操作步驟：

 一、ATP 的提取：

 1、血清（漿）中 ATP 的提?。喊凑昭澹{）體積（mL）：提取液體積（mL）為 1：5~10 的比 例（建議取約 0.1mL 血清（漿），加入 1mL 提取液），充分震蕩，10000g，4℃離心 10min；取 上清液至另一 EP 管中，加入 500μL 的氯仿充分震蕩混勻，10000g 4℃離心 3min，取上清，置 冰上待測(cè)（不可用于蛋白質(zhì)含量測(cè)定）。 

2、組織中 ATP 的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿，8000g 4℃離心 10min，取上清至另一 EP 管中，加入 500μL 的氯仿充分震蕩混勻，10000g 4℃離心 3min，取上清，置冰上待測(cè)（不可用于蛋白質(zhì)含量測(cè)定）。

 3、細(xì)胞或細(xì)菌中 ATP 的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液）， 超聲波破碎 1min（冰浴，強(qiáng)度 20％或 200W，超聲 2s，停 1s），10000g 4 ℃離心 10min；取上 清液至另一 EP 管中，加入 500μL 的氯仿充分震蕩混勻，10000g 4℃離心 3min，取上清，置冰 上待測(cè)（不可用于蛋白質(zhì)含量測(cè)定）

注意事項(xiàng)：

 1、 加入提取液離心后的上清若為渾濁為正常現(xiàn)象。 

2、 提取過程嚴(yán)格在冰浴條件下進(jìn)行。 

3、 當(dāng)吸光值大于 1.2 或者ΔA 測(cè)定大于 1.2 時(shí)，可以將樣品稀釋后進(jìn)行測(cè)定。若吸光值小于 0.01， 則可以增加反應(yīng)時(shí)間（5min 或 10min）來測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)品需要增加同樣的反應(yīng)時(shí)間。