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Western Blotting(WB)實驗代測,全程提供技術(shù)指導(dǎo)
億迅生物專業(yè)提供Western Blotting檢測服務(wù),全程提供技術(shù)指導(dǎo),代測時間為兩周,歡迎!Western Blotting檢測,WB實驗代測,WB實驗服務(wù)
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(Western blotting),它是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。
凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一種研究DNA 結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA 結(jié)合序列相互作用的技術(shù),可用于定性和定量分析。這一技術(shù)zui初用于研究DNA 結(jié)合蛋白,目前已用于研究RNA 結(jié)合蛋白和特定的RNA 序列的相互作用。
Western blot樣本要求
客戶需新鮮或正確保存的蛋白樣品, 檢測目的蛋白的一抗(或由本公司代購)。樣品要求為:
1、裂解樣品總蛋白量>500ug/樣品。
2、細胞樣品總蛋白濃度>1mg/ml。
3、組織樣品總蛋白濃度>10-15mg/ml。
Western blot結(jié)果及數(shù)據(jù)提供
內(nèi)參蛋白和目的蛋白曝光膠片各一張,可提供掃描圖,實驗報告,包括整個試驗流程所涉及的實驗數(shù)據(jù)和實驗步驟。如需進行蛋白純化服務(wù),將提供檢測報告
Western Blot顯色的方法主要有以下幾種:
i. 放射自顯影
ii. 底物化學(xué)發(fā)光ECL
iii. 底物熒光ECF
iv. 底物DAB呈色
現(xiàn)常用的有底物化學(xué)發(fā)光ECL和底物DAB呈色,體同水平和實驗條件的是用第一種方法,發(fā)表文章通常是用底物化學(xué)發(fā)光ECL。只要買現(xiàn)成的試劑盒就行,操作也比較簡單,原理如下(二抗用HRP標(biāo)記):反應(yīng)底物為過氧化物+魯米諾,如遇到HRP,即發(fā)光,可使膠片曝光,就可洗出條帶。
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