標題：酸性磷酸酶染色液（*法）

產品概述

產品名稱： 酸性磷酸酶染色液(*法)
規(guī)格：2X50ml
用途：酸性磷酸酶染色
注意事項：主要由孵育液、硫化液、陰性對照等組成。染色后酶活性部位呈棕黑色硫化鉛沉淀。
儲存條件：4℃,避光,6個月
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為蛋白質結構與功能研究， 需將蛋白質分離、 純化， 從而提高其比活。 分離蛋白質一般
用等電點沉淀、 鹽析和有機溶劑分級分離。 而純化則常用層析法、 分子篩和離子交換法。 可
能的話， 用親和層析。 后提純用電泳及等電點聚焦技術。
分離、 純化方法基于：
1. 根據(jù)分子大小
（1） 透析和超過濾 利用蛋白質分子不能透過半透膜， 使蛋白質和其他小分子物質分開，
叫透析。 利用壓力或離心力， 強使水和其他小分子溶質通過半透膜， 叫超過濾。
（2） 密度梯度離心 如果蛋白質顆粒在具有密度梯度的介質（常用蔗糖梯度） 中離心時，
質量和密度大的顆粒比質量和密度小的顆粒沉降快并且每種蛋白質顆粒沉降到與自身密度
相等的介質梯度時， 即停止不前， 后在各種離心管中被分離成各自獨立的區(qū)帶， 分部分收
集。
（3） 分子篩層析 也叫凝膠過濾。 它是根據(jù)分子大小分離蛋白質混合物的有效的方法
之一。當不同分子大小的蛋白質混合液通過裝填有高度水化的惰性多聚體（常用葡聚糖凝膠）
和瓊脂糖凝膠的層析柱時， 比凝膠“網眼” 大的蛋白質分子不能進入“網眼” 而被排阻在凝
膠顆粒之外， 后隨洗脫劑流出。 比“網眼” 小的分子則進入凝膠顆粒的內部。
2. 利用溶解度差別
（1） 等電點沉淀和 pH 控制 當?shù)鞍踪|混合物的 pH 被調到其中一種成分的等電點 pH 時，
則該蛋白質大部或全部將沉淀下來， 那些等電點高于或低于該 pH 的蛋白質仍留在溶液中。
這樣沉淀出來的等電蛋白保持著天然構象， 能再溶解。
（2） 鹽析 它是蛋白質制劑的分離和純化過程中常用的方法之一。 常用高濃度中性鹽，
如（NH 4 ） 2 SO 4 ， HgCl 2 等， 它們影響蛋白質溶解度的能力是它們離子強度的函數(shù)。 鹽析法能
保持蛋白質的天然構象， 能再溶解。
（3） 有機溶劑分級分離 乙醇、 丙垌等有機溶劑能加強同一或相鄰蛋白質分子中相反電
荷之間的吸引力， 使蛋白質分子趨于凝集、 沉淀。 操作須在低溫下進行。 
酸性磷酸酶染色液(*法)
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