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描述:測定意義:H2S是一種新型氣態(tài)信號分子,存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì),生理濃度的H2S對神經(jīng)系統(tǒng)海馬的長時程增強功能具有重要的調(diào)節(jié)作用,并對自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。測定原理:H2S與醋酸鋅、N, N-二甲基對苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍,亞甲基藍在665nm處有大吸收峰,通過測定其吸光值可計算H2S含量。H2S含量檢測試劑盒
標題:H2S含量檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
H2S含量檢測試劑盒
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體8mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體8mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體8mL×1瓶,4℃保存。
試劑五:液體1.5mL×1管,4℃避光保存。
樣品處理:
操作表:
| 空白管 | 測定管 |
樣品(μL) |
| 75 |
H2O(μL) | 75 |
|
試劑一(μL) | 75 | 75 |
充分震蕩混勻 | ||
試劑二(μL) | 75 | 75 |
12000rpm,4℃,離心10min,去上清,留沉淀 | ||
H2O(μL) | 150 | 150 |
12000rpm,4℃,離心10min,去上清,留沉淀 | ||
試劑一(μL) | 75 | 75 |
試劑三(μL) | 75 | 75 |
充分震蕩混勻 | ||
試劑四(μL) | 75 | 75 |
12000rpm,4℃,離心10min,取上清 | ||
試劑五(μL) | 15 | 15 |
室溫靜置20min,空白管調(diào)零,微量石英比色皿/96孔板,測定665納米吸光值,記為A665。 |
H2S含量計算:
標準曲線回歸方程為:y = 0.0044x,R2 = 0.9988
H2S含量(μmol/g 鮮重)= A665÷0.0044×稀釋倍數(shù)×1000÷W=7.27×105×A665÷W
(2)按樣本蛋白濃度計算
H2S含量(μmol/mg prot)= A665÷0.0044×稀釋倍數(shù)×1000÷Cpr=7.27×105×A665÷Cpr
(2)液體樣品H2S(μmol/L)= A665÷0.0044×稀釋倍數(shù)=727×A665
稀釋倍數(shù):(75μL+75μL+75μL)÷75μL=3.2;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g;1000:1mmol/mL=1000μmol/mL;
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線回歸方程為:y = 0.0022x,R2 = 0.9988
H2S含量(μmol/g 鮮重)= A665÷0.0022×稀釋倍數(shù)×1000÷W=1.454×106×A665÷W
(2)按樣本蛋白濃度計算
H2S含量(μmol/mg prot)= A665÷0.0022×稀釋倍數(shù)×1000÷Cpr=1.454×106×A665÷Cpr
(2)液體樣品H2S(μmol/L)= A665÷0.0022×稀釋倍數(shù)=1454×A665
稀釋倍數(shù):(75μL+75μL+75μL)÷75μL=3.2;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g;1000:1mmol/mL=1000μmol/mL;
H2S含量檢測試劑盒
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