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描述:測定原理:GST催化GSH與CDNB結合,其結合產物的光吸收峰波長為340nm;通過測定340nm波長處吸光度上升速率,即可計算出GST活性。谷胱甘肽S-轉移酶(GST)檢測試劑盒
標題:谷胱甘肽S-轉移酶(GST)檢測試劑盒
產品概述
谷胱甘肽S-轉移酶(GST)檢測試劑盒
測定意義:
GST是一種具有多種生理功能的蛋白質家族,主要存在于細胞質內。GST是體內解毒酶系統(tǒng)的重要組成部分,主要催化各種化學物質及其代謝產物與GSH的巰基共價結合,使親電化合物變?yōu)橛H水物質,易于從膽汁或尿液中排泄,達到將體內各種潛在或具備毒性的物質降解并排出體外的目的。因此,GST在保護細胞免受親電子化合物的損傷中發(fā)揮著重要的生物學功能。此外,因為GST具有GSH-Px活性,亦稱為non-Se GSH-Px,具有修復氧化破壞的大分子如DNA、蛋白質等的功能。注意,GST催化的反應減少GSH含量,但是不增加GSSG含量。
自備儀器和用品:
低溫離心機、水浴鍋、可調節(jié)移液器、紫外-可見分光光度計/、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加2 mL蒸餾水溶解。
粗酶液提取:
稱約0.1g樣品,加入1 mL試劑一,冰上充分研磨,10000rpm 4℃離心10min,取上清液待測。
測定:
1. 分光光度計預熱30 min以上,調節(jié)波長到340 nm,用蒸餾水調零。
2. 試劑三放在25℃(一般物種)或者37℃(哺乳動物)保溫。
3. 空白管:取微量石英比色皿或96孔板,加入20μL試劑一,180μL試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于340nm測定吸光度變化,記錄10 s和310 s吸光度為A1和A2。
4. 測定管:取微量石英比色皿或96孔板,加入20μL上清液,180μL試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于340nm測定吸光度變化,記錄10 s和310 s吸光度為A3和A4。
谷胱甘肽S-轉移酶(GST)檢測試劑盒
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