標(biāo)題：脯氨酸（PRO）含量試劑盒

產(chǎn)品概述

脯氨酸(PRO)含量試劑盒

測定意義：

Pro廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，逆境條件下，植物體內(nèi)Pro含量顯著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性強的品種往往積累較多的脯氨酸。因此，脯氨酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標(biāo)之一。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、冰乙酸25mL、甲苯50mL、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：冰乙酸25 mL×1瓶， 4℃保存。（自備）

試劑二：液體25 mL×1瓶， 4℃保存。

試劑三：甲苯50mL×1瓶，4℃保存。（自備）

樣品測定的準(zhǔn)備：

1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備 ：

細(xì)菌或細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，棄上清；按照每500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），之后置沸水浴振蕩提取10min；10000g，常溫離心10min，取上清，冷卻后待測。

組織：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進行冰浴勻漿；之后置沸水浴振蕩提取10min，10000g，常溫離心10min，取上清，冷卻后待測。

2、血清（漿）樣品：取100μL血清（漿）加入1mL提取液，充分混勻，之后置沸水浴振蕩提取10分鐘，10000g，常溫離心10分鐘，取上清，冷卻后待測。

測定步驟：

1. 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至520nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 樣本測定：

(1) 取0.25mL上清液+0.25mL試劑一+0.25mL試劑二 于2mL有蓋EP管中，置沸水浴中保溫30min（蓋緊，防止水分散失），每10min振蕩一次。

(2) 待冷卻后，加入0.5mL試劑三，振蕩30s，靜置片刻，使色素轉(zhuǎn)至試劑三中；吸取0.2mL上層溶液于微量石英比色皿或96孔板中，于520nm波長處比色，記錄吸光值A。

脯氨酸(PRO)含量試劑盒