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乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒

描述:測定意義:
LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應,伴隨著NAD+/NADH之間互變。
測定原理:
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2019-11-07
  • 訪問量:421
產品詳情/ PRODUCT DETAIL

標題:乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒

產品概述

乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:30mL×1瓶, 4保存;

試劑一:液體15 mL×1, 4保存;

試劑二:粉劑×1支,-20保存,用時加入1.3 mL雙蒸水充分溶解備用,配好后-20 保存,可保存兩周,禁止反復凍融;

試劑三:液體15 mL×1瓶,4保存;

試劑四:液體50 mL×1L,4保存;

樣品測定的準備:

1、 細菌、細胞或組織樣品的制備

細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,棄上清,按照每200萬細菌或細胞加入400μL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次)。8000g4離心10min,取上清,置冰上待測。

組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液或者生理鹽水進行冰浴勻漿。8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定操作表(在1mL EP管中反應)

試劑名稱(μL)

測定管

對照管

待測樣本

50

50

試劑一

250

250

試劑二

50

 

蒸餾水

 

50

充分混勻,37(哺乳動物)或25(其它物種)水浴15min

試劑三

250

250

充分混勻,37(哺乳動物)或25(其它物種)水浴15min

試劑四

750

750

充分混勻,室溫靜置3分鐘,450 nm下測定吸光度

注意事項:

1、粗酶液的提取必須在0 - 4中操做完成,以防止酶變性失活。測定過程中樣本﹑試劑二和標準應用液必須在冰上放置。

3、由于每個樣本都要做測定管和對照管,因此本試劑盒50管可測24個樣本。

乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒

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