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描述:測定意義:LOX廣泛存在于植物組織中,催化不飽和脂肪酸氧化反應(yīng),導(dǎo)致膜脂過氧化。在植物的生長發(fā)育、成熟衰老及逆境脅迫過程中具有重要作用。測定原理:LOX催化亞油酸氧化,氧化產(chǎn)物在234nm處有特征吸收峰;測定234nm吸光度增加速率,來計算LOX活性。植物中脂氧合酶(LOX)檢測試劑盒
標題:植物中脂氧合酶(LOX)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
植物中脂氧合酶(LOX)檢測試劑盒
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入2mL試劑二,充分溶解。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣品,加試劑一1mL,冰上充分研磨,16000g 4℃離心20min,取上清液待測。
測定:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長到234 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
3. 空白管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL蒸餾水、160μL試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于234nm比色,記錄15s和75s的吸光值,分別記為A1和A2。
4. 測定管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL上清液、160μL試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于234nm比色,記錄15s和75s的吸光值,分別記為A3和A4。
注意事項:
1.試劑三易自發(fā)氧化,從而導(dǎo)致空白管測定值偏高,必須臨用前配制。
2.樣品處理等過程均需要在冰上進行,且須在當日完成酶活性測定。
植物中脂氧合酶(LOX)檢測試劑盒
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