HRP標記的兔抗人IgM

描述：單體IgM在B細胞表面表達為膜結合抗體，在漿細胞分泌時表達為五聚體。由于它的高效價，IgM比其他同種型更有效地結合抗原和重復表位（病毒顆粒和紅細胞），并且比IgG更有效地激活補體途徑。mu恒定區(qū)的基因包含四個由短插入序列分隔的結構域。HRP標記的兔抗人IgM

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產品詳情/ PRODUCT DETAIL

標題：HRP標記的兔抗人IgM

產品概述

HRP標記的兔抗人IgM

重要提示：

本產品僅用于研究用途，不用于人類、治療或診斷應用。

抗體來源	Rabbit
克隆類型	Polyclonal
交叉反應
產品應用	WB=1:1000-10000 ELISA=1:1000-10000 IHC-P=1:100-1000 IHC-F=1:100-1000 not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
分子量	900kDa
性狀	Lyophilized or Liquid
濃度	2mg/1ml
免疫原	Full length plasma protein:
亞型	IgG
純化方法	affinity purified by Protein A
儲存液	0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件	Storage: Store at –20 oC for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20oC. When reconstituted in sterile distilled water or diluent supplied, theantibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

HRP標記的兔抗人IgM

一、戊二醛二步HRP標記法

1. 原理

戊二醛為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結合物。

2. 標記步驟

（1）稱取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中，于室溫靜置過夜。

（2）反應后的酶溶液經Sephadex G-25層析柱，用生理鹽水洗脫。流速控制在1ml/1分鐘，收集棕色流出液。如體積大于5ml，則以PEG濃縮至5ml。放置25ml小燒杯中，緩慢攪拌。

（3）將待標記的抗體12.5mg用生理鹽水稀釋至5ml，攪拌下逐滴加入酶溶液中。

（4）用1M PH9.5碳酸緩沖液0.25ml，繼續(xù)攪拌3小時。

（5）加0.2M賴氨酸0.25ml，混勻后，置室溫2小時。

（6）在攪拌下逐滴加入等體積飽和硫酸銨，置4℃ 1小時。

（7）3000rpm離心半小時，棄上清。沉淀物用半飽和硫酸銨洗二次，zui后沉淀物溶于少量0.15M PH7.4的PBS中。

（8）將上述溶液裝入透析袋中，對0.15M PH7.4的PBS緩沖鹽水透析，去除銨離子后(用萘氏試劑檢測)，10,000rpm離心30分鐘去除沉淀，上清液即為酶結合物，分裝后，冰凍保存。

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